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腦利鈉肽(BNP)

產(chǎn)品參數(shù)

抗體參數(shù)

名稱(chēng) 腦利鈉肽抗體(BNP antibody)
貨號(hào) K136m1 R195e5
類(lèi)型 單克隆抗體
反應(yīng)物種
應(yīng)用平臺(tái)
推薦配對(duì)
化學(xué)發(fā)光、免疫層析
R195e5(捕獲)-K136m1(檢測(cè))
純度 Protein A/G純化,純度>95%
緩沖液 1xPBS,pH 7.4
儲(chǔ)存 -20℃或更低溫度,分裝保存,避免反復(fù)凍融
產(chǎn)品數(shù)據(jù)

產(chǎn)品數(shù)據(jù)

1.雅培樣本符合率

用BNP抗體(R195e5、K136m1)制成的化學(xué)發(fā)光試劑,檢測(cè)55例雅培賦值樣本,樣本符合率(R2)為0.9988。

編號(hào) 樣本濃度
(pg/mL)
RLU
1 <10 8355
2 <10 9563
3 15.3 21366
? ? ?
54 3750 5689869
55 >4000 6971339

表1. BNP臨床對(duì)比分析數(shù)據(jù)(雅培賦值)

BNP臨床對(duì)比分析(雅培賦值)

圖1. BNP臨床對(duì)比分析(雅培賦值)

2.最低檢測(cè)限

用BNP抗體(R195e5、K136m1)制成的化學(xué)發(fā)光試劑,對(duì)零濃度稀釋液重復(fù)測(cè)定20次,計(jì)算最低檢測(cè)限。

名稱(chēng) 濃度(pg/mL) RLU平均值 線性方程
校準(zhǔn)品S1 0 4833 y=274x+4833
校準(zhǔn)品S2 5 6203
20次重復(fù)測(cè)定零濃度稀釋液RLU值
4766 4836 5122 4879
4933 4988 4820 4566
4803 5103 4766 4968
5108 5269 4822 4875
4998 5169 4923 4888
RLU均值 4930
SD 165.8
平均值+2SD 5262
最低檢測(cè)限(pg/mL) 1.565

表2. BNP化學(xué)發(fā)光試劑最低檢測(cè)限

3.線性

將濃度為5010pg/mL的雅培賦值高濃度樣本,用樣本稀釋液稀釋為40%、20%、10%、2%、0.2%和0.1%六個(gè)濃度。用BNP抗體(R195e5、K136m1)制成的化學(xué)發(fā)光試劑對(duì)高濃度樣本及六個(gè)稀釋樣本進(jìn)行檢測(cè),計(jì)算相關(guān)性。

百分比 濃度(pg/mL) RLU 絕對(duì)偏差 相對(duì)偏差
100% 5010 7616661 / -0.10%
40% 2021 3045882 / 0.70%
20% 1002 1487627 / -0.10%
10% 492.5 708500 / -1.80%
2% 101.3 110277 / 0.80%
0.2% 10.18 12850 -0.06 /
0.1% 4.93 6114 -0.07 /
相關(guān)性:0.99999

表3. BNP化學(xué)發(fā)光試劑線性

4.重復(fù)性

利用同一批BNP抗體(R195e5、K136m1)制成的化學(xué)發(fā)光試劑對(duì)濃度為50.28pg/mL和1019pg/mL的雅培賦值樣本各重復(fù)檢測(cè)10次,其測(cè)量濃度變異系數(shù)(CV)均小于2.5%。

低值樣本
編號(hào) RLU 濃度(pg/mL)
1 65235 51.01
2 63682 49.80
3 65222 51.00
4 64580 50.50
5 65607 51.30
6 66890 52.30
7 66338 51.87
8 62438 48.83
9 63502 49.66
10 67082 52.45
平均值 / 50.87
標(biāo)準(zhǔn)差 / 1.187
CV 2.3%

表4. BNP化學(xué)發(fā)光試劑重復(fù)性(低值)

高值樣本
編號(hào) RLU 濃度(pg/mL)
1 1492215 1003
2 1462854 985.8
3 1507507 1015
4 1483346 999.2
5 1571733 1048
6 1572866 1048
7 1565617 1053
8 1516682 1021
9 1505978 1014
10 1482275 998.5
平均值 / 1018.55
標(biāo)準(zhǔn)差 / 23.691
CV 2.33%

表5. BNP化學(xué)發(fā)光試劑重復(fù)性(高值)

5.準(zhǔn)確度

將濃度為1001pg/mL的雅培賦值高濃度樣本,按照1:9的體積比加入到濃度為49.23pg/mL的低濃度血清中,配制成濃度為144.41pg/mL的回收樣品,用BNP抗體(R195e5、K136m1)制成的化學(xué)發(fā)光試劑進(jìn)行檢測(cè),計(jì)算回收率。

待測(cè)物 測(cè)定濃度(pg/mL) RLU 濃度平均值(pg/mL)
高濃度樣本 1002 1487627 1004.50
999.5 1483804
1012 1502919
低濃度血清 50.16 64144 49.57
49.88 63785
48.68 62245
回收樣品 144.2 184797 140.77
137.8 176586
140.3 179794
回收率 95.72%

表6. BNP化學(xué)發(fā)光試劑回收率

6.熱穩(wěn)定性

將BNP抗體(R195e5、K136m1)制成的化學(xué)發(fā)光試劑組份分別放置于37℃培養(yǎng)箱和4℃冰箱中加速7天,分別測(cè)試高、低值質(zhì)控品,比較其偏差。

低值質(zhì)控品
編號(hào) RLU 濃度(pg/mL)
4℃7天 37℃7天 4℃7天 37℃7天
1 62501 60962 48.88 47.68
2 65516 62219 51.23 48.66
3 63798 60936 49.89 47.66
偏差 4.2%

表7. BNP化學(xué)發(fā)光試劑熱穩(wěn)定性(低值)

高值質(zhì)控品
編號(hào) RLU 濃度(pg/mL)
4℃7天 37℃7天 4℃7天 37℃7天
1 1492215 1451232 1005 978.2
2 1502919 1436552 1012 968.6
3 1487627 1439458 1002 970.5
偏差 3.6%

表8. BNP化學(xué)發(fā)光試劑熱穩(wěn)定性(高值)

試用申請(qǐng)

試用申請(qǐng)

BNP臨床診斷意義

BNP臨床診斷意義

腦鈉肽(BNP)又稱(chēng)B型利鈉肽,由32個(gè)氨基酸組成,是哺乳動(dòng)物心肌細(xì)胞的主要利鈉肽之一。BNP的最初翻譯產(chǎn)物為前BNP原(preproBNP),含134個(gè)氨基酸;切除信號(hào)肽后形成含108個(gè)氨基酸的BNP前體(proBNP),并儲(chǔ)存于心肌分泌顆粒中。當(dāng)心肌細(xì)胞在跨壁應(yīng)激增加時(shí),proBNP釋放并裂解成有活性的BNP和無(wú)活性的N端腦鈉肽前體(NT-proBNP)。BNP最終與鈉肽C受體(NPR-C)結(jié)合,繼而被胞吞和溶酶體降解。

腦鈉肽(BNP)與心功能不全、心肌缺血

BNP濃度在心功能紊亂時(shí),隨著心室壓力的增大而顯著升高;心衰患者接受治療12小時(shí)之后,BNP濃度顯著下降。 因此BNP可作為心力衰竭和心肌梗死預(yù)后的一個(gè)獨(dú)立預(yù)測(cè)因子,動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)心衰患者的治療效果,是急診室心衰診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”。

BNP參考值(依據(jù)2008ESC心衰指南):

BNP< 100pg/ml 基本排除心衰,其陰性預(yù)測(cè)準(zhǔn)確性高達(dá)97.7%
100pg/ml< BNP< 400pg/ml 不確診
BNP >400pg/ml 心衰可能

腦鈉肽(BNP)與急性缺血損傷

心肌缺血可觸發(fā)許多內(nèi)源性細(xì)胞保護(hù)因子如BNP的釋放。在急性心肌梗死的大鼠心臟模型中,外源性給予BNP,可以以濃度依賴(lài)性的方式限制梗死面積,這是一種獨(dú)立于肽的內(nèi)分泌的細(xì)胞保護(hù)作用。BNP的這種急性保護(hù)作用機(jī)制似乎與第二信使三磷酸鳥(niǎo)苷轉(zhuǎn)化為環(huán)磷酸鳥(niǎo)苷(cGMP)的增加有關(guān),并涉及線粒體ATP敏感性鉀(KATP)通道的開(kāi)放。許多內(nèi)源性保護(hù)介質(zhì)被認(rèn)為是作用于G蛋白偶聯(lián)受體,通過(guò)線粒體KATP通道開(kāi)放產(chǎn)生抗缺血作用的。在一些心臟疾病狀態(tài)下, G蛋白偶聯(lián)受體反應(yīng)可能下調(diào);此時(shí)BNP采用了新的分子信號(hào)途徑,BNP/NPR-A誘導(dǎo)cGMP升高并激活cGMP依賴(lài)性蛋白激酶-I(cGK-I),通過(guò)cGMP/cGK-I途徑開(kāi)放KATP通道。因此BNP/NPR-A信號(hào)通路可以作為一種非常有效的儲(chǔ)備救助途徑,保護(hù)和挽救組織。

腦鈉肽(BNP)與心肌梗死后重塑

心肌梗死后心肌BNP表達(dá)的持續(xù)升高,影響組織重塑,這個(gè)可能與BNP抑制成纖維細(xì)胞活性和心肌細(xì)胞肥大作用有關(guān)。研究表明,梗死后BNP和心鈉素(ANP)對(duì)心肌成纖維細(xì)胞有明顯作用。這兩種肽都抑制體外缺氧時(shí)心臟成纖維細(xì)胞的膠原合成,并抑制血管緊張素Ⅱ刺激時(shí)的成纖維細(xì)胞增殖。在bnp基因缺失的小鼠中發(fā)現(xiàn)了多灶性心臟纖維化。NPR-A-/-敲除小鼠也會(huì)出現(xiàn)高血壓,并伴有過(guò)度表達(dá)心肌肥大和纖維化。

綜上所述,腦鈉肽(BNP)是一種多效性肽,其對(duì)無(wú)癥狀左室功能不全、心力衰竭、急性缺血和心肌梗死等心臟疾病具有重要的臨床診斷和治療意義。

參考文獻(xiàn)

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