IVD原料質(zhì)量控制

體外診斷試劑原料是體外診斷行業(yè)的突破點(diǎn)。體外診斷產(chǎn)品的質(zhì)量很大程度上是由上游的IVD試劑原料決定的。
我國體外診斷試劑行業(yè)在我國起步較晚，屬于較新興產(chǎn)業(yè)，與歐美國家相比發(fā)展相對滯后。近幾年我國體外診斷試劑行業(yè)已從導(dǎo)入期步入發(fā)展期，市場需求快速增長，國內(nèi)企業(yè)抓住機(jī)遇，憑借產(chǎn)品性價比高和更為貼切本土市場的優(yōu)勢，不斷搶占市場份額，使原本以進(jìn)口產(chǎn)品為主導(dǎo)的原料市場格局被逐漸打破。隨著國內(nèi)體外診斷行業(yè)的迅速發(fā)展，創(chuàng)新、優(yōu)質(zhì)、穩(wěn)定、大批量的體外診斷試劑原料公司異軍突起，且越來越受到體外診斷試劑廠商的重視和青睞。但由于行業(yè)競爭激烈，部分生產(chǎn)廠商為了壓縮生產(chǎn)成本從而降低了原料的質(zhì)量控制，是我國目前原料生產(chǎn)行業(yè)質(zhì)量參差不齊的重要因素。

那么，如何保證IVD原料的高質(zhì)量至關(guān)重要。以下內(nèi)容主要是對抗原/抗體診斷原料的質(zhì)量控制進(jìn)行概述。

質(zhì)量控制

原料質(zhì)量控制：包括對于動物源品質(zhì)的控制、培養(yǎng)基質(zhì)量的控制、生物安全性檢測等。IVD原料不是簡單的制備蛋白，還需要考慮原料的特異性、靈敏度、批間差、純度等性能。

細(xì)胞庫質(zhì)量控制：（1）抗體診斷原料的制備離不開雜交瘤細(xì)胞。雜交瘤細(xì)胞在數(shù)次傳代后會出現(xiàn)活力逐步下降現(xiàn)象，若細(xì)胞株保存不善受到污染，對抗體原料的影響也很嚴(yán)重。因此細(xì)胞株科學(xué)的保存、復(fù)蘇及傳代是非常必要的。（2）目前，少數(shù)的抗原抗體診斷原料生產(chǎn)廠家采用采用體外重組表達(dá)的方式獲得IVD原料，保證了原料的純度、批間差等性能。表達(dá)系統(tǒng)包括原核表達(dá)和哺乳動物表達(dá)。

生產(chǎn)和純化：抗體原料的生產(chǎn)方式主要分為體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)兩種。體內(nèi)培養(yǎng)是通過小鼠腹水培養(yǎng)而得，而體外培養(yǎng)則是通過生物反應(yīng)器而得。由于動物保護(hù)問題和動物個體間的潛在差異，體外培養(yǎng)生產(chǎn)抗體可能會成為主要的生產(chǎn)方式。目前原料的純化方式主要為親和層析和離子交換層析，其中對于單抗而言，主要以protein A/G 的親和層析為主；對于多抗，則以高純度的抗原親和層析為主；對于抗原，多以親和純化的方式。

出廠質(zhì)檢

在《體外診斷試劑生產(chǎn)及質(zhì)量控制技術(shù)指導(dǎo)原則》（征求意見稿）中對體外診斷試劑原料常規(guī)檢測項(xiàng)目進(jìn)行了概述：

外觀：肉眼觀察，大部分體外診斷試劑原料為澄清均一的液體，不含異物、渾濁或搖不散的沉淀或顆粒；或?yàn)榘咨勰┣也缓衅渌s質(zhì)。

純度和分子量：主要方法是SDS-PAGE電泳后經(jīng)考馬斯亮藍(lán)或者銀染色法進(jìn)行染色，然后對條帶進(jìn)行掃描分析。此外，高效液相層析也可以用于純度和分子量測定。作為體外診斷試劑用的IVD原料，用銀染法染色后，純度一般要大于90%；用考馬斯亮藍(lán)染色后，純度一般都要大于95%。

蛋白濃度：主要測定方法為Lowry法、OD280nm光吸收法和雙縮脲法等。需要注意的是，不同方法學(xué)之間的結(jié)果存在一定差異，因此建議可以采取與原料廠商一致的方法進(jìn)行驗(yàn)證。

抗體效價：效價的測定一般根據(jù)擔(dān)保含量測定結(jié)果，通過倍比稀釋法進(jìn)行。效價應(yīng)達(dá)到規(guī)定的要求。

功能性：包括特異性、靈敏度、穩(wěn)定性、批間差、精密度等功能性分析，并比較其與上一批次原料的相關(guān)性。

參考文獻(xiàn)

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